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亚麻籽油的安全性与功能性评价
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摘要：亚麻是一种高油料作物，又称胡麻，主要用于植物油脂——亚麻籽油的提取[1]。亚麻籽油中含丰富的营养成分，如维生素E、甾醇等，还含有特有的亚麻木酚素与亚麻肽[2-3]。另外，亚麻
亚麻是一种高油料作物，又称胡麻，主要用于植物油脂——亚麻籽油的提取[1]。亚麻籽油中含丰富的营养成分，如维生素E、甾醇等，还含有特有的亚麻木酚素与亚麻肽[2-3]。另外，亚麻籽油的脂肪酸中不饱和脂肪酸含量较高，其中α-亚麻酸含量高达40%以上，是目前最理想的单一植物油脂[4-5]。因其特有的营养成分及比例，研究表明在治疗心血管疾病、糖尿病等多种疾病方面具有显著的疗效[6-7]，亚麻籽油被誉为植物界的“深海鱼油”，市场开发前景巨大[8-9]。因此，广大的学者针对亚麻籽油的制备工艺、参数优化、营养成分进行深入的研究[10-11]。
亚麻籽油因其独特的营养品质，针对其提取及加工已取得了一定的成果[12]，其相关产品的开发应用前景必然广阔。因此，本文以大鼠为研究对象，进行为期4周的实验，主要考察亚麻籽油对大鼠体重、进食量、食物利用率、脏体比的影响，并进一步分析高剂量实验组的大鼠胃、肠、脾、肝脏等组织病理学的变化，分析亚麻籽油对大鼠身体功能的影响，为其全面利用和开发亚麻籽油提供科学指导和理论依据，为开发功能保健食品提供借鉴。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
亚麻籽油（亚麻酸含量40%），由山西五台山沙棘制品有限公司提供，为浅黄色至黄色液体。体重65 ～79 g 清洁级SD 大鼠80 只，雌雄各半，由上海莱斯克实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK（沪）2012-0008。体重18 ～22 g 清洁级ICR雌性小鼠200 只，由上海莱斯克实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK（沪）2012-0002。饲料，由上海普路腾生物科技有限公司提供，许可证号：沪饲证（2014）04001。
注射用墨汁，刀豆蛋白A（ConA），MTT，DNFB，丙酮，麻油，SRBC，生理盐水，鸡红细胞，羊红细胞，甲醇，Giemsa 染色，YAC-1 细胞，Hanks液（pH 7.2 ～7.4），RPM 完全培养液，乳酸锂，碘硝基氯化四氮唑（INT），吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）、NAD、Tris-HCl 缓冲液（pH8.2），1%NP40，台酚兰，1mol/L 盐酸，酸性异丙醇等。
1.2 仪器设备
SHANDON EXCELSIOR 全自动密封脱水机，电热鼓风干燥箱，OlympusIX71 倒置显微镜，8 mm 直径打孔器，微量血凝试验板，2-16K 通用离心机，RT-6100 酶标仪，96 孔培养板，Co-150 CO2培养箱，UV-1800 紫外可见分光光度计，OlympusIX71 倒置显微镜，电子天平，显微镜。
1.3 实验方法
1.3.1 受试样品及配制
亚麻籽油的成人日推荐量为3 g，即0.05 g·kg-1BW（成人体重以60 kg 计）。功能性评价实验组按日推荐量的5 倍、10 倍、30 倍配制受试样品浓度，分别为0.150、0.050、0.025 g·mL-1的高、中、低3个剂量组，以食用大豆油作为对照组。
临用前，称取亚麻籽油15 g 与食用大豆油混合均匀至100 mL，为高剂量组；取高剂量组样品40 mL，与食用大豆油混合均匀至120 mL，为中剂量组；取中剂量组样品40 mL，与食用大豆油混合均匀至80 mL，作为低剂量组；安全性评价实验组按照亚麻籽油受试物成人日推荐量的25、50 和100 倍，设3个剂量组为1.25、2.50、5.00 g·kg-1BW，受试样品采用同功能性评价小组相同的配制方法。
1.3.2 动物分组与给药
（1）安全性评价实验组。参照韩飞等[13]的方法，各性别动物按体重随机分成4 组、每组10 只。试验按照亚麻籽油受试物成人日推荐量的25、50 和100 倍，设3个剂量组为1.25、2.50、5.00 g·kg-1BW，另设食用大豆油为空白对照。试验期间单笼喂养，自由进食饮水，每天定点灌胃（10 ∶00），观察动物形态，分别进行试验。
（2）功能性评价实验组。200只小鼠随机分成5大组，再分成4 小组，每小组10 只小鼠，按0.150、0.050、0.025 g·mL-1的高、中、低剂量组每天定点灌胃（10 ∶00），连续灌胃30 d 后，分别进行试验。
1.3.3 安全性评价实验组实验方法
对选取的安全性实验组的大鼠连续灌胃30 d，进行食物利用率、病理组织学检查。食物利用率公式为：
1.3.4 功能性评价实验组实验方法
（1）小鼠体重的测定。标记每只小鼠，对小鼠定点测定体重，记录小鼠的初始体重和终期体重。
（2）免疫器官系数。参照张勇[14]的实验方法。小鼠适应性喂养3 d，随机分成对照组、高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组10 只。按每日10 mL·kg-1BW 连续灌胃，连续30 d，末次给药5 h 后，脱颈椎处死小鼠，称量小鼠体重，取腹腔液后，无菌分离肝脏和脾脏，称重。
（3）碳廓清实验。末次给药5 h 后，注射印度墨水并记时，2、10 min，分别取内眦静脉丛血20 μL，并立即加入2 mL 0.1%NaCO3溶液中，以NaCO3溶液为空白对照，在600 nm 处测定OD 值，将小鼠处死后，取出肝脏、脾脏后称重，计算吞噬指数a。
文章来源：《立体定向和功能性神经外科杂志》 网址: http://www.ltdxhgnxsjwkzz.cn/qikandaodu/2021/0205/331.html